
Teste de tetrazólio: como avaliar a viabilidade de sementes e garantir o sucesso da sua pastagem
Em simples passos, o guia definitivo para nunca mais cometer erros que comprometem o teste que pode definir o sucesso da sua pastagem. Entenda como fazer o teste que apresenta os resultados com precisão e agilidade.
Por: Gabriel H. J. F. Silva e Heloisa Da Anunciação Borges
Assegurar a qualidade das sementes é essencial para garantir uma colheita produtiva e sustentável. O teste de viabilidade é uma ferramenta crucial para determinar a capacidade das sementes de germinar e desenvolver-se em plantas saudáveis. Além da sua precisão e confiabilidade nos resultados, o teste de tetrazólio foi amplamente implementado devido sua agilidade, que se destaca quando comparado ao tempo de duração do teste de germinação. O teste de germinação possui um período maior de execução, podendo variar de 21 a 28 dias para sua completa execução, dependendo de cada espécie analisada. Nesse artigo mostraremos como proceder para realizar o teste de viabilidade de forma eficaz e precisa, voltado a culturas de Urochloa spp. e Megathyrsus spp.
A viabilidade das sementes é um indicador de sua capacidade de germinação e crescimento. Testes de viabilidade são especialmente importantes para sementes forrageiras, que frequentemente apresentam dormência ou germinação lenta. Afinal, como tem que ser realizado este teste? Vamos te ensinar de maneira didática, seguindo os padrões estabelecidos pela Regra para Análise de Sementes (BRASIL, 2019).
Alguns processos citados durante o artigo terão mais de uma possibilidade de execução, para cada uma seus parâmetros se alteram. Essa variedade busca facilitar a aplicação do teste. Para cada método escolhido, é necessário consultar a alternância desses parâmetros através do quadro 6.1 da RAS na página 232. Esse quadro apresenta os padrões a serem seguidos a cada método escolhido, tais como: tempo e temperatura de pré-umedecimento, proporção da receita para solução, tempo e temperatura da coloração.
Para realizar o teste de viabilidade, você precisará dos seguintes materiais:
– Porção de sementes puras
– Solução de brometo de tetrazólio
– Placas de Petri
– Papel filtro
– Microscópio estereoscópico ou lupa
– Pinças e bisturi
– Água destilada
– Banho maria ou BOD com temperatura controlada.
Amostra de trabalho
Comece separando 200 sementes da porção de sementes puras. Segundo a RAS o teste deve ser realizado em duas repetições de 100 sementes ou quatro de 50, totalizando 200 sementes.
Pré-Umedecimento
Antes de iniciar o corte das sementes para coloração, é necessário realizar o pré-umedecimento das mesmas. Esse processo hidrata a semente, facilitando seu manuseio e trabalho. Também, facilita o corte para exposição de tecidos, e diminui a chance de danos mecânicos por manuseio. Além de tudo, o pré-umedecimento da semente auxilia na absorção da solução que será imersa. Podendo ser feito de dois modos:
Umedecimento lento: a semente é disposta sobre ou entre papel, sendo armazenada em banho maria, com temperatura de 30 ºC por 18 horas.
Embebição direta em água: envolva a semente em um papel filtro e as coloque imersas em água destilada.
Cada método busca atender uma necessidade diferente, entretanto, cada um destes variam suas Para informações mais aprofundadas consulte o quadro 6.1 da RAS, na página 232.
Exposição dos tecidos para coloração
Para que a solução sejam absorvida corretamente as sementes devem ter seus tecidos externados para facilitar a coloração e avaliação. Sendo assim, é possível analisar detalhadamente cada área interna, interpretando sua viabilidade e caso houver, os tipos de danos que ocorreram. Para as espécies citadas usa-se comumente o método de apresentação dos tecidos através de um corte longitudinal na metade do eixo embrionário, alcançando aproximadamente três quartos do comprimento do endosperma utilizando de pinça e bisturi.
Vale lembrar que durante todo o processo é necessário manter a semente hidratada e as lâminas usadas devem sempre estar afiadas, diminuindo o risco de danos ao embrião. Ao fim do corte, as sementes seguem para coloração.
Aplicação da Solução de Tetrazólio
Para o processo de coloração as sementes devem estar completamente cobertas com a solução e que não estejam expostas a luz, pois a luz reduz o sal da solução. Após esse primeiro cuidado, coloque as sementes em uma solução incolor de brometo de tetrazólio. Os parâmetros escolhidos variam de acordo os métodos escolhidos. Siga os padrões estabelecidos no quadro 6.1 da RAS.
A solução para imersão da semente deve ser preparada usando o brometo de tetrazólio e água destilada. Caso a água destilada não se adeque a faixa de trabalho de pH 6,5-7,5 o sal deverá ser dissolvido em solução tampão.
Durante a imersão, a solução de tetrazólio interage com os tecidos vivos da sementes através do processo respiratório, que por sua vez são coloridas. As partes viáveis das sementes ficarão com uma coloração vermelha vibrante, indicando que as células estão vivas e respirando.
Avaliação
Após a coloração, lave as sementes em água corrente com contatos mecânicos suaves afim de remover o excesso de sal, que pode intervir no resultado. Para análise, utilize um microscópio estereoscópico ou uma lupa para observar as partes coloridas. Sementes viáveis apresentarão a cor vermelha vibrante, enquanto sementes não viáveis terão colorações indefinidas ou não serão coloridas. Em caso de sementes parcialmente colorida deve-se seguir a figura apresentada abaixo.
Fonte: Regra para Análise de Sementes
Cálculo da Viabilidade
A viabilidade é determinada pela porcentagem de sementes viáveis em relação ao total testado. Por exemplo, se 80 das 100 sementes foram classificadas como viáveis, a viabilidade é de 80%. Calcule a média das repetições para obter um resultado confiável.
Esperamos que este guia tenha fornecido uma compreensão clara e prática de como realizar um teste de viabilidade em sementes forrageiras. A implementação correta desses métodos pode fazer uma diferença significativa na eficiência e nos resultados das culturas de pastagem. Se houver dúvidas ou necessidade de mais informações, estamos à disposição para auxiliar suporte adicional.
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